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寡核苷酸池(Oligo Pools)定制

o 每一个池里最多有12,472或92,918 oligos,即一次可提供多达12,472或92,918条引物。

o 高保真度,错误率仅为0.5%,即200 bases中只有1个错误碱基。

o 每条引物有1 fmole的全长DNA片段。

o 可合成长达170 bases的引物。

o 可用于合成生物学、基因合成、靶向测序及复合DNA文库等。

12,472条以内引物池(Oligo Pools)的报价

碱基长度(base)  价格(人民币元)
10-79  14,000
80-10916,000
110-13018,000
131-15019,000
151-17021,000

*2-3周交货


92,918条以内引物池(Oligo Pools)的报价

碱基长度(base)  价格(人民币元)
10-79  35,000
80-10940,000
110-13044,000
131-15048,000
151-17053,000

*2-3周交货


寡核苷酸池(Oligo pools)应用指南


寡核苷酸池(Oligo pools)的引物设计和扩增我们可以提供一些通用的使用指南,但对于具体的实验,我们的指南只能作为一般性的指导原则,您需要根据实验条件调整具体的实验步骤。Oligo pools的使用指导原则主要包括以下几点:


o 将所有序列加上一套通用引物,并在使用前进行PCR扩增。PCR扩增可以达到纯化Oligo pools的效果,因为失败的引物序列(指5’端缺失的引物序列)不能进行扩增。

o 为了达到较高的退火温度我们建议使用高Tm值或较长的引物。一般而言,较高的退火温度可减少引物错配,增强扩增的特异性。

o PCR扩增时我们建议不要用常规的Taq酶,推荐使用热启动酶,常用的有Fusion,Q5,Pfu,Vent和Platinum Taq酶。对于酶的选择需要谨慎,有些酶在使用前需要检测。

o 由于不同用户的序列长度、引物设计和聚合酶体系不同,因此起始模板的使用量也不同。作为PCR模板,建议使用反应总体积的1/100、1/400、1/1600、1/6400和1/25600进行梯度试验。设定PCR循环数比如25个循环进行扩增,使用凝胶或者Bioanalyzer检测PCR产物的量。只要PCR产物量达到要求,则使用体积较少的模板量作为最终的模板使用量。

o 如果需要从产物中提取多组序列,则先使用巢式PCR扩增全部的序列然后使用内引物扩增各组序列。仅一轮PCR可能不会得到较好的结果。

o 去除引物的基本策略由Oligo pools下游应用的具体需要而定,例如平末端和粘性末端。

o 对于通常的克隆来说,用户可以在通用引物内部插入IIS型限制性内切酶能够识别的酶切位点,PCR扩增后再去除通用引物。这些限制性内切酶可以在识别位点附近进行酶切,保持可变序列的完整性。限制性酶切后,寡核苷酸序列即可插入载体。

Oligo Pool使用注意事项