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新型蛋白酶K  Mutant Proteinase K


目录号规格价格
PTK-100100mg100元

产品简介


新型蛋白酶K基因来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)的蛋白酶K基因,经过了基因定点突变和酵母细胞分泌表达、色谱纯化。经过蛋白质工程化的新型蛋白酶K提高了比活性和纯度,不含有细菌内毒素,应用范围比天然蛋白酶K更广泛。新型蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种,在pH 4pH 12的条件下均有活性,反应温度介于075°C之间。在常用浓度的SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。酶切割位点在脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,可以用于所有蛋白质的降解。目前主要应用于基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除核酸酶和其它蛋白污染。新型蛋白酶K的应用也包括工业领域提取非蛋白类生物制品核酸、多糖类药物,例如DNA疫苗和肝素的制备,也可用于皮肤保健去除老化角质层细胞、糅皮、制备水解蛋白调味品等场合,取代其它蛋白酶种类。


货号:PTK-100
规格:100 mg普通装、1100 g包装,以及工业酶客户定制。
酶活性值:标准33.5 U/mg(冻干粉型),680 U/mL(液体型),500 kU/kg(工业型)。
来源种属:林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber),酵母重组表达。
相对分子质量:29.3 kD


贮存和使用

固体酶可以室温运输,4°C以下条件下低温保藏。打开包装后,请及时使用,以防止固体酶吸潮。

液体酶低温运输,-20°C贮存。液体酶使用后及时放置于-20°C环境。

保质期:正确的贮存条件下,有效期为3年;液体酶有效期1年。

稀释缓冲液:20 mM Tris-Cl (pH 7.4), 1mM CaCl2, 50%甘油


质量控制

活性单位定义

37°CpH 7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1 µmol酪氨酸的蛋白酶K的量,定义为一个单位(U)。

脱氧核糖核酸酶残留

λ DNA为底物,37°C消化6小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶残留

λ DNA为底物,25°C消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。


参考文献

1. Kraus, E; et.al. Proteinase K from the Mold Tritirachium album limber, Specificity and Mode of Action. Z. Physiol. Chem., 357:939; 1976.

2. Jany,KD, et al. Amino Acid Sequence of Proteinase K from the Mold, Tritirachium album limber. Proteinase K; a Subtilisin-related Enzyme with Disulfide Bonds. FEBS Letter, 199,139.1986.


产品外观和质量检验

1、产品外观和国外产品原位电泳比较:


2、酶活测定:


固体酶的酶活为:34.0 U/mg干粉。

酶活力测定的标准曲线Enzyme activity assay, according to the protocol from Sigma-Aldrich


3、产品纯度蛋白质纯度超过99%(激光扫描SDS-PAGE凝胶)。


3、核酸残留琼脂糖电泳检测结果,未见核酸残留none detectable


4.全血基因组提取Genomic DNA extraction):

Lane 1:1 kbp DNA Marker(10000、8000、6000、5000、4000、3000、2000、1000 bp

Lane 2:对照为Merck’s proteinase K

Lane 3:受检物为Gproan’s proteinase K

全血DNA量提取

Miniprep using whole blood

OD260

OD280

OD260/OD280

Concentration

µg/mL

Yield

µg

Merck’s proteinase K

Lot20121022

0.188

0.099

1.90

94

9.4

Gproan’s proteinase K

Lot20130412

0.194

0.100

1.94

97

9.7


5、稳定性测试

三年内,固体酶的酶活力无变化;

液体酶(-20°C储存)的酶活力值达到初始值的95%


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