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HotSensorTM PCR MasterMix

为提升反应特异性提出的解决方案


目录号数量价格

HPM-5

5×1mL

530元


产品概述


HotSensorTM PCR MasterMix是我们为提高DNA产物的特异性提出的解决方案。


本产品包含HotSensorTM DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。其中HotSensorTM DNA聚合酶是一种经过基因改造的热启动酶。在室温下,HotSensorTM DNA聚合酶处于失活状态,只有高温才可以激活其酶活性。同时HotSensorTM DNA聚合酶还存在一个单链DNA黏合蛋白(single-strand DNA binding protein),该蛋白可以将引物隔离。这两个特性使得HotSensorTM DNA聚合酶在常温下能避免非特异性结合与扩增,适用于需要非常高的专一性的实验。


使用预先配制的2× HotSensorTM PCR MasterMix,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,最大限度提高了通量和结果的重现性。扩增产物3'端带A,可以直接用于T/A载体克隆。绿色的染料在1%的琼脂糖凝胶中与3-5kb DNA片段的迁移率相同,黄色的染料在1%的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快(<50bp)。


使用说明


1.冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后短暂离心。

2.我们强烈建议客户购买本产品后分装成小份避免反复冻融。

3.以50μl反应体系为例,按照下表在0.2ml PCR管中加入下列成分:


50ul反应体系

2 × MasterMix

25ul

上游引物(10μM)

1ul

下游引物(10μM)

1ul

模板

10pg-0.5ug

ddH2O

加至50ul


4. 短暂离心将反应液收集到管底。

5. 若基因扩增仪不防蒸发,请加1-2滴石蜡油。

6. 在PCR仪上执行以下程序(仅供参考):


步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

3-5min

1

变性

94℃

30sec

25-35

退火

Tm-5℃

30sec

延伸

72℃

1min/kb

后延伸

72℃

5min

1


注:在实际操作中需根据模板的结构、扩增片段的大小和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。




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