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SuperGoldTM High Fidelity PCR EasyMasterMix

为高保真性和快速实验提出的最终解决方案


目录号数量价格

SPEM-5

5×1mL

640元


产品概述


SuperGoldTM High Fidelity PCR EasyMasterMix 是我们为对保真性和速度有极其严苛要求的实验所提出的最终解决方案。

本产品包含SuperGoldTM High Fidelity DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。

其中SuperGoldTM High Fidelity DNA聚合酶具有极高的保真性,其保真性是Taq DNA聚合酶的69倍,是普通Pfu DNA聚合酶的8倍。极高的保真性使得其可以被用于克隆超长片段。通过SuperGoldTM High Fidelity PCR MasterMix来对简单模板如质粒和λ DNA进行扩增,有效长度可 40 kb;对一般的基因组进行扩增,有效长度可达 20 kb;对难度较大的片段如cDNA进行扩增,有效扩增长度可达 10 kb。

此外,SuperGoldTM High Fidelity DNA聚合酶扩增速度可达15 sec/kb,是Taq DNA聚合酶的4倍,几乎接近于我们为快速实验设计的FasterTM DNA聚合酶的扩增速度(10 sec/kb)。

使用预先配制的1× SuperGoldTM High Fidelity PCR MasterMix,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,最大限度提高了通量和结果的重现性。EasyMasterMix系列本身含有蓝紫色染料,扩增完成后可直接上样进行电泳检测。


使用说明


1.冰浴中彻底融化1×EasyMasterMix,混匀后短暂离心。

2.我们强烈建议客户购买本产品后分装成小份避免反复冻融。

3.以50μl反应体系为例,按照下表在0.2ml PCR管中加入下列成分:


50ul反应体系

上游引物(10μM)

1ul

下游引物(10μM)

1ul

模板

10pg-0.5ug

1 × EasyMasterMix

加至50ul


4. 短暂离心将反应液收集到管底。

5. 若基因扩增仪不防蒸发,请加1-2滴石蜡油。

6. 在PCR仪上执行以下程序(仅供参考):


步骤

温度

时间

循环数

预变性

98

3-5min

1

变性

98

10sec

25-35

退火

Tm-5℃

10sec

延伸

72℃

15sec/kb

后延伸

72℃

5min

1


注:在实际操作中需根据模板的结构、扩增片段的大小和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。




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